21 剥离了descemet的膜作为支持人类胚胎干细胞衍生的视网膜色素上皮细胞培养的潜在工具

科学领域:

• 眼科和再生医学眼科和再生医学
• 生物材料科学 生物材料科学
• 干细胞生物学 干细胞生物学

背景情况:

• 视网膜退行性疾病导致视力丧失,RPE细胞替代疗法显示出有前途.
• 多能干细胞可以分化为RPE细胞,用于治疗.
• 基于脚手架的输送方法正在研究子内脏移植.

研究的目的:

• 研究人类胚胎干细胞衍生的视网膜色素表皮质 (hESC-RPE) 细胞在脱细胞化Descemet的膜 (DM) 上的生存和行为.
• 评估非细胞性DM作为视网膜移植的支架的潜在临床相关性.

主要方法:

• 使用thermolysin.in对人类捐赠角膜Descemet膜 (DM) 进行隔离和脱细胞化.
• 通过原子力显微镜和组织学评估DM表面拓和脱细胞化效率.
• 在无细胞DM上播种hESC-RPE细胞,以评估细胞培养支持,活力,单层完整性 (透皮性耐药性),RPE特异性基因/蛋白质表达和生长因子分泌.

主要成果:

• 热molysin治疗有效地使DM脱细胞化,而不损害组织完整性.
• hESC-RPE细胞在无细胞DM上表现出与标准组织培养插件相似的附着和增殖.
• hESC-RPE细胞在无细胞DM基板上形成成熟,可活的单层,具有特征性的RPE形态,基因表达和功能,长达4周.

结论:

• 无细胞DM支持hESC-RPE细胞的生长,成熟和活力,表明其作为Bruch膜替代支架的潜力.
• 这种方法突出了回收不适合用于眼科再生医学应用的角膜组织的可能性.
• 进一步的体内研究是有必要的,以验证非细胞性DM作为可行的输送工具,用于视网膜移植中的RPE细胞.