使用酵母双混合方法评估米索中异黄的雌激素活性
Yuuki Higa1, Rika Nagano2, Makoto Kanauchi2
1Central R&D Laboratory, Kobayashi Pharmaceutical Co., Ltd., Osaka, Japan.
Journal of food science
|June 7, 2023
概括
这项研究使用了酵母双杂交方法来评估米索中异黄的雌激素活性,为动物试验提供了更快的体外替代方案. 米索,特别是麦米索,含有异黄素,这些异黄素表现出雌激素agonist和对手活动,这取决于人类雌激素受体亚型.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 评估食品化合物如异黄的雌激素活性的传统方法依赖于耗时且昂贵的体内动物模型.
- 在米索等食物中发现的异黄可以表现出复杂的相互作用,作为人类雌激素受体 (hER) 的激素剂或对抗剂.
- 开发替代体外方法对于有效和道德评估这些化合物至关重要.
研究的目的:
- 建立和验证一种体外酵母双混合方法,用于在 miso 中评估异黄的雌激素活性.
- 评估米索中存在的异黄与不同的人类雌激素受体亚型 (hERα和hERβ) 的特定相互作用.
- 为了比较酵母模型的疗效与传统的体内方法来评估异黄活性.
主要方法:
- 准备表达人类雌激素受体 (hER) 基因的复合酵母菌株,以模拟人类细胞反应.
- 使用工程酵母测定17β-雌激醇和异黄标准溶液的测定,测量β-葡萄糖酶的产生作为活性指标.
- 在各种miso样本中定量化了daidzein,genistein和glycitein,重点是Mame miso,并使用酵母两杂交系统分析了它们的雌激素活性.
主要成果:
- 酵母双杂交系统成功地证明了雌激素活性,17β-雌激醇与Y187-αα结合,基因斯坦与Y187-ββ结合.
- miso 样本,特别是 Mame miso,含有显著度的异黄 (daidzein,genistein,glycitein) 显示出对hERββ的雌激素活性.
- 异黄在hERαα上充当17β-雌激醇的对抗剂,但在hERαβ和hERββ上充当激动剂,突出了亚型特异性相互作用.
结论:
- 酵母双杂交方法提供了一个可行的体外替代方案,用于评估食物中异黄的雌激素活性,模仿人类雌激素受体相互作用.
- 与动物实验相比,这种方法提供了一种更有效和更具成本效益的方法,用于评估异黄的复杂激素/对抗素作用.
- 这些发现强调了米索作为生物活性异黄的来源的潜力,其对雌激素受体亚型具有差异性影响.
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