在细胞外囊泡流细胞计中防止群体检测:一种临床上适用的程序

科学领域:

• 生物医学工程 生物医学工程
• 分析化学 分析化学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 流细胞计对于检测细胞衍生的细胞外囊泡 (EVs) 在等离子体等生物流体中至关重要.
• 群体检测是同时粒子照明的产物,导致EV度测量不准确.
• 目前用于防止群体检测的方法,如样本稀释,由于样本度的变化,对于例行临床分析是不切实际的.

研究的目的:

• 开发一种用于确定最佳血样本稀释的实用方法,用于EV流细胞计.
• 通过减轻群体检测来确保临床研究中准确的EV量化.

主要方法:

• 使用流细胞计 (Apogee A60-Micro) 测量了五个血样本的稀释序列,颗粒度从2.5 × 10^9到2.1 × 10^11 mL^-1.
• 分析数据以确定防止群体检测的条件,同时保持统计学上显著的粒子计数.

主要成果:

• 在稀释量≥1.1 × 10^3倍或计数率<3.0 × 10^3事件·s^-1.0时消除了群体检测.
• 然而,这些个别标准往往导致粒子计数不足.
• 将最小稀释与最大计数速率相结合,被证明是防止群体检测和保持显著粒子计数的最有效方法.

结论:

• 使用单个稀释血样本的测量计数率的实用程序可以确定最佳稀释因子.
• 对于所研究的条件,最优的稀释系数≥1.1 × 10^2倍,加上计数率<1.1 × 10^4事件·s^-1阻止了群体检测.