针对模块化转胺酶组装的增强型-结合的设计和演变
Anthony H Keeble1,2, Dominic P Wood1, Mark Howarth1,2
1Department of Biochemistry, University of Oxford, South Parks Road, Oxford OX1 3QU, U.K.
Bioconjugate chemistry
|June 8, 2023
概括
研究人员开发了SnoopLigase2,一种用于合成生物学的分子超级. 这种工具能够精确地附着蛋白质,增强合成纳米架构和细胞功能.
科学领域:
- 合成生物学 合成生物学
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质工程是指蛋白质工程.
背景情况:
- 合成纳米架构需要强大的工具来增强功能和弹性.
- 现有的蛋白质结合方法往往缺乏速度,效率或与生物系统的兼容性.
研究的目的:
- 为了设计一种快速起作用的分子超级,用于精确的蛋白质功能化.
- 开发一种基因编码的系统,用于在生物环境中高效的转基因化.
主要方法:
- 细菌粘附蛋白的定向进化和合理设计.
- 菌体显示查以优化SnoopTag2和DogTag2的快速反应.
- 为了增强稳定性和最小的自我反应性,工程转质氨酶2 (TG2).
- 应用SnoopLigase2系统在哺乳动物细胞中的共价显示和功能化.
主要成果:
- 产生了SnoopLigase2合系统,实现了99%以上的转amidation完成.
- 反应速率加速1000倍以上,在缓冲区,pH值和温度之间具有广泛的兼容性.
- 通过哺乳动物分泌途径,成功地将TG2:TGFα结合体在血上共价显示.
- 证明保留的TG2活性和TGFα的稳定定用于信号激活,从而导致重新编程的细胞行为.
结论:
- 该SnoopLigase2系统提供了一个强大的,基因编码的工具,用于快速和特定的蛋白质结合.
- 这种模块化工具箱能够在生物材料和复杂细胞环境的工程中实现新的应用.
- 开发的系统克服了在生物体内蛋白质功能化基因融合的局限性.
