对I基因型日本脑炎病毒作为外国基因表达的稳定病毒载体的评估
Chenxi Li1, Linjie Zhang2, Xuan Chen2
1College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, 225009, China; Comparative Medicine Research Institute, Yangzhou University, Yangzhou, 225009, China; Jiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou, 225009, China.
Antiviral research
|June 10, 2023
概括
日本脑炎病毒 (JEV) 基因型I菌株作为基因传递载体表现出极好的稳定性. 这些重组病毒有效地表达外来基因,并显示出疫苗开发和诊断的前景.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 疫苗开发 疫苗开发
背景情况:
- 弗拉维病毒基因组对于基因传递和疫苗开发具有吸引力,但通常表现出遗传不稳定性.
- 开发用于外基因表达的稳定复合黄病毒仍然是一个重大挑战.
研究的目的:
- 评估日本脑炎病毒 (JEV) 作为使用逆遗传学进行异基因表达的稳定flavivirus载体的潜力.
- 评估基于JEV的载体的遗传稳定性和外基因表达能力.
主要方法:
- 利用逆转基因来构建基于基因型I (GI) JEV的重组病毒.
- 对比了GI JEVcDNA基因组与基因型III (GIII) JEV菌株在细菌宿主中的稳定性.
- 产生和特征复合病毒表达各种外来基因,评估稳定性超过十个串行通道在体外.
- 开发了一种基于图像的测试方法,使用mCherry-reporter JEV矢量 (rBJ-mCherry) 进行抗体测试和药物发现.
- 接种了JEV载体表达非洲猪瘟病毒 (ASFV) 和古典猪瘟病毒 (CSFV) 抗原的接种疫苗的小鼠.
主要成果:
- 与GIII JEV菌株相比,GI JEV的cDNA基因组表现出优越的稳定性和操纵性.
- 再组合的GI JEV载体在体外表现出了出色的遗传稳定性和高效的外基因表达.
- 该rBJ-mCherry记者病毒使得中和抗体和抗病毒药物查的快速,可靠的测试成为可能.
- 在小鼠中,表达ASFV和CSFV抗原的重组病毒成功地引起了对JEV载体和外来抗原的抗体反应.
结论:
- 基因型I JEV菌株具有高度稳定性,并且是适合适应和表达大型外来基因的病毒载体.
- 基于JEV的载体为开发新型疫苗和诊断工具提供了一个有希望的平台.
- 这项研究验证了GI JEV作为一个多功能和强大的病毒载体系统的使用.
