基于链式杂交的CRISPR侧流测定使得精确的基因视觉检测成为可能
Meng Cheng1, Caiwei Tan1, Bo Xiang1
1Department of Laboratory Medicine, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou, China.
Analytica chimica acta
|June 13, 2023
概括
一个新的CRISPR-CHLFA平台克服了基因检测试验中的假阳性. 这种核酸杂交方法为传染病提供了准确的,可视化的治疗点检测.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 诊断 诊断 诊断 诊断
背景情况:
- 使用横向流量试验 (CRISPR-LFA) 的CRISPR-Cas基因检测显示出对照点检测的前景.
- 传统的CRISPR-LFA方法通常会产生错误的阳性结果,因为它们依赖于基于免疫的测试条.
研究的目的:
- 开发一种基于CRISPR的新型横向流量试验 (CHLFA),可以消除假阳性.
- 建立一个高度准确和可视化的基因检测平台,用于点的护理应用.
主要方法:
- 开发了一种基于链杂交的侧向流量测试 (CHLFA) 平台,利用核酸杂交.
- 集成的CRISPR-Cas12a或CRISPR-Cas13a与GNP探针杂交,绕过免疫反应的需要.
- 在50分钟内对目标基因检测进行测试,敏感度降至1-10个基因拷贝.
主要成果:
- 该CRISPR-CHLFA系统成功地消除了常规CRISPR-LFA中常见的假阳性结果.
- 实现了高精度的目标负样本的视觉检测.
- 在临床样本中检测SARS-CoV-2 Omicron变种和Mycobacterium结核病的100%准确性.
结论:
- 克里斯普尔-CHLFA平台为准确,可视化的基因检测提供了一个强大的替代方案.
- 这项技术适用于开发先进的护理点测试 (POCT) 生物传感器.
- 在疾病诊断方面,CHLFA比现有的CRISPR-LFA方法提供了显著的改进.
