提高在不同环境条件下Aptamer性能的高通量策略

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 在特定条件下选择的适合剂在不同的环境中往往会失去亲和力,从而限制了它们的生物医学用途.
• 生物医学应用需要在复杂的生物样本 (如血液或尿液) 中运行aptamers.

研究的目的:

• 开发一种高通量选程序,以适应现有的aptamers适应新的环境条件.
• 为了增强对特定测试条件,如生理环境的aptamer亲和力.

主要方法:

• 利用改进的DNA测序器进行高通量选,对高达10^7个aptamer突变物进行了选.
• 选了在高离子强度缓冲器中选择的葡萄糖胺体的所有单个和双替代突变.

主要成果:

• 在一轮查后,在生理条件下近四倍增加的亲和力.
• 从单基替代物观察到适度的改善,但从双突变物观察到显著的结合增强,表明合作效应.

结论:

• 高通量选方法有效地适应了适应物对变化的环境条件.
• 这种方法可以对各种体和条件进行概括,在各种应用中为体工程提供了强大的工具.