多重复合反转录循环介导的同热放大与基于核酸的侧向流量滴杆相结合,作为检测SARS-CoV-2的快速诊断方法

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学
• 诊断 诊断 诊断 诊断

背景情况:

• 目前的COVID-19诊断方法在速度,成本和准确性方面存在局限性.
• 新出现的SARS-CoV-2变种具有增加的传染性和潜在的免疫逃避,需要快速,可靠的诊断工具.
• 需要敏感,特定和具有成本效益的分子测试来进行点诊断 (POC).

研究的目的:

• 开发用于检测SARS-CoV-2的快速,敏感和特定的分子诊断套件.
• 利用循环介导的同热放大 (LAMP) 进行快速的病毒基因放大.
• 将LAMP与侧流量计 (LFD) 技术集成在一起,用于多重化,护理点检测.

主要方法:

• 为RT-LAMP测试设计了四组六个初始向保存的SARS-CoV-2基因组区域的六个初始向.
• 优化了RT-LAMP协议以快速检测SARS-CoV-2基因.
• 配合RT-LAMP与侧流量测量器 (LFD),用于同时检测两个放大目标.

主要成果:

• 检测到SARS-CoV-2基因的时间仅为10分钟,最佳灵敏度为30分钟.
• 该试验表现出高灵敏度,检测到仅100个模板DNA拷贝.
• 多重RT-LAMP-LFD系统成功地检测到单个LFD条带上的双基因放大.

结论:

• 开发了一种快速,多重的RT-LAMP-LFD测定方法,用于敏感和特定的SARS-CoV-2检测.
• 这种方法适用于在各种环境 (包括实验室和家庭) 中的临床诊断.
• 开发的测试解决了对COVID-19的快速,经济高效的分子诊断的需求,即使是新出现的病毒变异.