使用来自牛单细胞的树突细胞确定疫苗免疫性
Fatima Liaqat1, Richard Thiga Kangethe1, Rudolf Pichler1
1Animal Production and Health Section, Joint Food and Agriculture Organization (FAO)/International Atomic Energy Agency (IAEA) Centre of Nuclear Techniques in Food and Agriculture, International Atomic Energy Agency.
Journal of visualized experiments : JoVE
|June 15, 2023
概括
这项研究提出了一种标准化的方法,用于在体外生成牛体树突细胞 (DCs),以评估疫苗的有效性. 开发的试验准确地测量了牛的疫苗免疫性,有助于早期的疫苗候选人选择.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 兽医医学 兽医医学 兽医医学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 树突细胞 (DCs) 是强大的抗原呈现细胞 (APCs),对于连接先天性和适应性免疫至关重要.
- 在牛中评估疫苗免疫性需要可靠的体外方法来预测体外试验之前的疗效.
研究的目的:
- 建立一种标准化体外方法,用于产生来自牛单细胞的树突细胞 (MoDCs).
- 应用这种MoDC生成方法来评估牛的疫苗免疫性.
主要方法:
- 从牛外围血液单核细胞 (PBMC) 中分离CD14+单细胞,使用基于磁性的细胞分类.
- 使用介质素-4 (IL-4) 和颗粒细胞-巨细胞殖民地刺激因子 (GM-CSF) 将单细胞分化为天真的MoDC.
- 通过表达表面标记物 (MHC II,CD86,CD40) 确认MoDC成熟,并通过狂犬病疫苗进行抗原脉冲后评估T细胞增殖和细胞因子生产 (IFN-γ).
主要成果:
- 通过表面标记表达证实未成熟的牛MODCs的成功生成.
- 抗原脉冲的MoDCs刺激了T淋巴细胞的增殖 (Ki-67,CD25) 并诱导了抗原特异性免疫反应 (IFN-γ,Ki-67mRNA).
- 与对照组相比,在狂犬病疫苗脉冲的MoDC-淋巴细胞共同培养中,IFN-γ的分泌显著增加 (p < 0.01).
结论:
- 在体外开发的MoDC测定方法是测量牛疫苗免疫性的一种有效方法.
- 这种测定可以用于预先选候选疫苗,并在广泛的体内试验之前评估商业疫苗.
