SEC-seq:分子特征与数千个单个人体血细胞中的抗体分泌的关联
Rene Yu-Hong Cheng1,2, Joseph de Rutte3, Cade Ellis K Ito1,4
1Center of Immunotherapy and Immunity, Seattle Children Research Institute, Seattle, WA, 98101, USA.
Nature communications
|June 15, 2023
概括
研究人员开发了一种新方法来测量来自单个人类B细胞的IgG分泌量. 这种技术将分泌水平与细胞表面标记物和基因表达联系起来,推进免疫学和干细胞研究.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 细胞分泌对于体内功能至关重要,但将分泌水平与特定细胞特征 (如表面标记物和转录体) 联系起来是一个挑战.
- 现有的方法没有能力直接将单个细胞的功能输出 (分泌) 与其分子谱相关联.
研究的目的:
- 开发和验证一种用于量化单细胞蛋白质分泌的新型工作流程.
- 为了将个人人类B细胞分泌的免疫球蛋白G (IgG) 量与其表面标记物和转录组联系起来.
- 识别与高IgG分泌相关的新型代孕标记物.
主要方法:
- 利用含有腔的水凝纳米细胞来积累单细胞的分泌物.
- 采用流细胞计和成像流细胞计来测量IgG分泌和证实标记器关联.
- 具有单细胞测序 (SEC-seq) 的集成寡核酸标记抗体,用于分析转录组数据.
- 研究了IgG分泌水平与特定细胞通路之间的关联.
主要成果:
- 成功地将单个人类B细胞的IgG分泌量与其表面标记物 (例如CD38,CD138) 和转录组联系起来.
- 鉴定了细胞内膜网膜蛋白位址和线粒体氧化酸化通路的上调调节与高IgG分泌高度相关.
- 发现了新的替代体血细胞表面标记物,如CD59,表明高IgG分泌能力.
结论:
- 开发的SEC-seq方法有效地将细胞分泌量与单细胞水平的基因组信息联系起来.
- 这种方法为探索各种生物背景中的基因组功能关系提供了一个强大的工具.
- 通过实现全面的单细胞功能分析,为免疫学,干细胞生物学和其他领域的重大发现奠定了基础.
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