一种简单的方法来产生复合性伪狂犬病病毒,表达猪肉病毒2d类型的体蛋白质
Jingqiang Ren1,2,3, Rachel Madera1, Chase Cunningham1
1Department of Anatomy and Physiology, College of Veterinary Medicine, Kansas State University, Manhattan, KS, United States.
Frontiers in microbiology
|June 16, 2023
概括
这项研究提出了一种有效的方法,用于生成复合性伪狂犬病病毒 (PRV),使用特定的DNA分裂部位,非常适合疫苗研究. 优化的方法简化了病毒DNA隔离和重组病毒的产生,节省了宝贵的时间.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 疫苗开发 疫苗开发
背景情况:
- 同类重组对于生成复合病毒至关重要,例如用于疫苗研究的伪狂犬病病毒 (PRV).
- 重组病毒的生成效率取决于病毒基因组完整性和线性化部位的选择.
研究的目的:
- 开发一种简单,节省时间的方法来生产高完整度的重组PRV.
- 为了确定PRV基因组中最佳的分裂点,以实现高效的同源重组.
主要方法:
- 建立了一种从大型DNA病毒中分离高基因组完整性病毒DNA的方法.
- 增强的绿色光蛋白 (EGFP) 被用作记者基因,以评估PRV重组效率在各种裂变部位.
- 通过将线性化PRV-EGFPDNA和捐献载体转化为BHK-21细胞来实现重组PRV构造.
主要成果:
- 确定XbaI和AvrII裂变点是PRV重组的最佳地点,与其他地点相比,产生更高的效率.
- 再组合的PRV-EGFP病毒在传染后1-2周内得到了斑块净化.
- 一种新的重组PRV-PCV2d_ORF2病毒成功地使用优化方法快速构建.
结论:
- 在XbaI和AvrII站点显著提高PRV重组效率.
- 这种简化方法有助于快速生产重组PRVs.
- 描述的方法有可能适应在其他DNA病毒系统中生成重组病毒.
