在人类1型糖尿病中模拟细胞介导免疫力,通过工程自反应性CD8⁺ T细胞

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 内分泌学 在内分泌学.
• 遗传学 是一个遗传学.

背景情况:

• 1型糖尿病 (T1D) 的发病包括胰腺小岛的免疫细胞透,CD8+ T细胞主要介导β细胞的破坏.
• 了解这些自反应性CD8+T细胞的精确受体特异性和功能至关重要,但由于它们在外周血液中的低频率,具有挑战性.

研究的目的:

• 为了设计具有特定T细胞受体 (TCR) 识别岛屿抗原的初级人类CD8+T细胞.
• 研究使用CRISPR/Cas9结合lentiviral TCR基因转移对T细胞功能和特异性的内源性TCRα链基因编辑的影响.

主要方法:

• 在原始人类CD8+T细胞中,CRISPR/Cas9介导的内源TCRα链基因 (TRAC) 的淘汰.
• 一种针对小岛抗原IGRP (小岛特异性葡萄糖-6-酸酶催化子单元) 的新型TCR的lentiviral载体介导的转移.
• 对TCR配对,T细胞激活标记物 (granzyme B,干扰素-) 和对人类β细胞系的细胞毒性进行评估.

主要成果:

• TRAC淘汰赛增强了新的TCR配对和:MHC-dextramer染色.
• 工程T细胞表现出增加的激活和效应器功能标志物.
• HLA-A*02:01受限制的CD8+T细胞被设计成识别IGRP,对HLA-A*0201+人类β细胞系表现出增强的细胞毒性.

结论:

• 针对TRAC和TCR基因转移的定向基因组编辑可以成功设计人类CD8+T细胞的特异性.
• 这种方法使得在T1D中自反应性T细胞的机制研究成为可能.
• 这种方法对开发旨在诱导T1D等自身免疫性疾病耐受性的细胞疗法充满希望.