通过非核糖体合成酶将皮佩拉西克酸纳入的定向进化
Philipp Stephan1, Chloe Langley2, Daniela Winkler1
1Junior Research Group Biosynthetic Design of Natural Products, Leibniz Institute for Natural Product Research and Infection Biology (HKI), Beutenbergstr. 11a, 07745, Jena, Germany.
研究人员设计了一种非核糖体合成酶 (NRPS),以接受一种非标准的氨基酸 - - 皮佩拉酸 (Piz). 这一突破使得新型抗生素类似物通过定向进化的合成成为可能.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 合成生物学 合成生物学
- 酵素工程是什么? 酶工程是什么
背景情况:
- 非核糖体合成酶 (NRPSs) 对于生产抗微生物至关重要.
- 工程生物合成酶允许合成抗生素的结构类似物.
- 修改NRPS特异性是扩大抗菌化合物多样性的关键.
研究的目的:
- 为改变基质特异性设计一种与林特异的NRPS腺化域.
- 为了证明针对NRPS特异性切换的定向进化的实用性.
- 为了合成含有Piz的新型格拉米西丁S类似物.
主要方法:
- 一个Pro-特定的NRPS腺化域的定向进化.
- 小型突变库的合理设计.
- 超高性能液体染色学-并联质谱学 (UPLC-MS/MS) 进行选.
- 合成一种Piz衍生的格拉米西丁S模拟物.
主要成果:
- 将基质特异性完全切换为 piperazic 酸 (Piz).
- 成功生产了一种Piz衍生品格拉米西丁S类似物.
- 在NRPS特异性工程中证明了低通量方法的可行性.
结论:
- 定向进化可以有效地改变NRPS基质的特异性.
- 这种方法为新型抗微生物提供了一条可行的途径.
- 强化了NRPS工程可访问方法的潜力.
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