通过流细胞计测量测量SQSTM1
Jessica C Hargarten1, Guowu Hu1, Waleed Elsegeiny1
1Translational Mycology Section, Laboratory of Clinical Immunology and Microbiology, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA.
Autophagy
|June 19, 2023
概括
我们开发了一种快速流动细胞计量试验,以测量细胞内SQSTM1 (序列组1),这是自的关键标志物. 这种方法比监测自流的传统技术提供了更高的吞吐量和灵敏度.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 宏自/自是细胞降解过程中生存和调节细胞功能的关键.
- SQSTM1/p62 (序列组1) 作为选择性自受体,使其成为评估自流量的有价值标志物.
- 测量SQSTM1水平的传统方法,如免疫血栓检测,在吞吐量和灵敏度上可能受到限制.
研究的目的:
- 提出一种简单,快速和敏感的流动细胞计量试验,用于量化细胞内SQSTM1.1.
- 提供一种高吞吐率的方法来监测自流,减少细胞材料的需求.
主要方法:
- 开发一种流细胞测量试验,以测量细胞内SQSTM1水平.
- 使用易于获得的试剂和标准的流量细胞计设备.
- 应用记者蛋白来评估SQSTM1在老鼠和人类细胞中的各种遗传和化学操纵中的表达.
主要成果:
- 流式细胞计量试验表明,与免疫阻塞相比,灵敏度提高,吞吐量更高.
- 该试验在血清饥饿,基因操纵和用巴菲洛米辛A1 / 黄素治疗的情况下成功检测了细胞内SQSTM1水平的趋势.
- 该方法不需要细胞传染,使用标准的实验室设备.
结论:
- 开发的流细胞计量试验提供了一种可靠和有效的方法,通过测量细胞内SQSTM1.1,来评估自容量和流量.
- 这种分析适用于细胞生物学研究中的各种应用,包括对自调节和疾病的研究.
- 该试验的灵敏度,吞吐量和减少的材料要求使其成为研究人员研究自的宝贵工具.
