光染色脂质滴滴的分析与3D重建用于肝硬化评估肝硬化
Karina Garcia1, André Alves2, Teresa M Ribeiro-Rodrigues2
1Institute of Pharmacology & Experimental Therapeutics & Coimbra Institute for Clinical and Biomedical Research (iCBR), Faculty of Medicine, University of Coimbra; Center for Innovative Biomedicine and Biotechnology (CIBB), University of Coimbra; Clinical Academic Center of Coimbra (CACC); Polytechnic Institute of Coimbra, Coimbra Health School.
Journal of visualized experiments : JoVE
|June 19, 2023
概括
这项研究提出了一个优化的BODIPY 493/503染色协议,用于准确地可视化和量化肝脏组织中的脂质滴 (LD). 这种新方法可靠地区分了微风流体和宏风流体肝肥胖症,为传统染色技术提供了有价值的替代方案.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 历史学 历史学 历史学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 脂质滴 (LD) 对于脂质储存和预防脂质毒性至关重要,但它们在肝脏中的积累 (肝硬化) 构成健康风险.
- 传统的油红O染色用于肝脏样本中的LDs具有局限性.
- 脂性光体,如BODIPY 493/503,对LD可视化有希望,但它们在组织样本中的应用需要优化.
研究的目的:
- 开发和验证一个使用BODIPY 493/503的优化协议,用于评估高脂肪饮食诱导的肝肥的动物模型中的LDs.
- 评估BODIPY 493/503的可靠性,以鉴定LDs的特征,并区分肝脏组织中的微粒细胞和巨粒细胞肥胖症.
主要方法:
- 为肝脏样本的准备,切割,BODIPY 493/503染色和图像分析建立了一个优化的协议.
- 该协议应用于高脂肪饮食 (HFD) 动物模型中的肝脏样本.
- 用直角投影和3D重建来进行详细的LD分析.
主要成果:
- 肝硬化器显著增加了肝脏LDs的数量,强度,面积比和直径.
- BODIPY 493/503染色允许在LDs中清晰可视化中性脂质核心.
- 该协议成功地区分了微囊泡,中间囊泡和巨囊泡,使得微囊泡和巨囊泡胆固醇症的区分成为可能.
结论:
- 优化的BODIPY 493/503基于光的协议为肝脏LD表征提供了可靠和简单的方法.
- 这种方法提供了一种有价值的补充方法,用于研究肝硬化症的经典组织学技术.
