治疗性蛋白质的高压光散射,以检测聚合和蛋白质-蛋白质相互作用
Jordan E Berger1,2, Susana C M Teixeira1,2, Christopher J Sloey3
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of Delaware, Newark, Delaware 19716, United States.
The journal of physical chemistry. B
|June 22, 2023
概括
一种新的高压光散射装置可以直接在现场测量蛋白质稳定性和相互作用. 该工具有助于描述蛋白质聚合和压力下的蛋白质-蛋白质相互作用,有助于优化分散数据分析.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 蛋白质科学 蛋白质科学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 在高压下直接在现场测量蛋白质稳定性和相互作用至关重要,但由于现有的分析方法而受到限制.
- 高压 (HP) 散射仪器是罕见的,因为开发的挑战和缺乏标准化.
研究的目的:
- 使用商用设备设计,操作和应用新的高压 (HP) 光散射装置.
- 为了允许更广泛的应用来评估蛋白质稳定性和在水静压下相互作用.
主要方法:
- 开发并使用了一种新的HP光散射装置.
- 对单克隆抗体 (MAbs) 和酶进行了in situ和ex situ测量.
- 使用压力循环和尺寸排除色谱进行聚合分析.
主要成果:
- 观察到不同MAbs和压力下的离子强度的不同聚合范围.
- 使用尺寸排除色谱在压力化后量化单体损失.
- 评估压力诱导的可逆和不可逆聚合,以及通过第二次透性病毒系数的蛋白质-蛋白质相互作用.
结论:
- 新的HP光散射装置为研究压力下的蛋白质行为提供了一种方便且可重复的方法.
- 该技术补充了现有的中子/X射线散射方法,并有助于解释散射数据.
- 这些结果满足了对蛋白质聚合物和易聚合的中间体进行表征的需求.
