一个C.的生成. elegans tdp-1的零等位基因和人性化的TARDBP含有人类疾病变体
Jeremy Lins1, Trisha J Brock2, Chris E Hopkins2
1Department of Neuroscience, Brown University, Providence, RI 02912.
microPublication biology
|June 23, 2023
概括
研究人员通过编辑tdp-1基因,为前性痴呆症 (FTD) 和肌缩性侧面硬化症 (ALS) 创建了一个新的C. elegans模型. 这种表达人类TARDBP的模型有助于研究疾病变异和神经退行.
科学领域:
- 遗传学和分子生物学
- 神经科学是一个神经科学.
- 模型生物的发展模式
背景情况:
- TARDBP的临床变种与前性痴呆症 (FTD) 和肌性侧面硬化症 (ALS) 有关.
- TARDBP的C. elegans Ortholog是tdp-1,但其功能性ortology在体内尚未确定.
- 为FTD和ALS开发准确的C. elegans模型对于了解疾病机制至关重要.
研究的目的:
- 为了为C. elegans tdp-1基因创建一个功能性的零等位基因.
- 为了生成一个人性化的C. elegans模型,表达人类TARDBP (hTARDBP).
- 为FTD和ALS研究建立C. elegans模型,其中包含与患者相关的TARDBP变体.
主要方法:
- 使用CRISPR/Cas9基因组编辑,创建了一个功能完全丧失的tdp-1等位基因 (tdp-1(tgx58).
- 基于CRISPR的基因组编辑被用来用人类TARDBP编码序列取代tdp-1外显子,从而创建了hTARDBP C. elegans.
- 建议使用coCRISPR标记物的代基因组编辑策略,以高效地组装大型转基因.
- 在C. elegans的hTARDBP位点中插入了五种不同的患者TARDBP变体.
主要成果:
- 在tdp-1(tgx58) 无基因基因基因表现出氧化应激后的神经退行.
- 人性化的hTARDBP C. elegans模型部分挽救了tdp-1的神经退行缺陷 (tgx58),证明了功能性跨物种的ortology.
- 在五种引入的患者TARDBP变体中,只有一个显著增加了C. elegans的压力诱导的神经退行;其他显示的效果是最小的或不一致的.
结论:
- 一个明确的tdp-1无基因基因和一个验证的,人性化的hTARDBP C. elegans模型被成功生成.
- 该研究为未来的研究提供了多个携带患者相关的ALS/FTD变体的C. elegans模型.
- 这些模型为研究TARDBP变体和疾病机制的体内影响提供了一个有价值的平台.
