在不同发育阶段的湖 (Acipenser fulvescens) 组织中使用敏感的液体染色体质谱法测定甲状腺激素
Sonam Tamrakar1, Jacob G Kimmel1, Yu-Wen Chung-Davidson1
1Department of Fisheries and Wildlife, Michigan State University, East Lansing, MI, USA.
概括
我们开发了一种敏感的LC-MS/MS方法来量化湖的甲状腺激素 (T4,T3,RT3). 这种方法追踪了早期发育期间的荷尔蒙变化,有助于鱼类的生长和转化研究.
科学领域:
- 内分泌学 在内分泌学.
- 水生生物学 水生生物学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 甲状腺激素 (TH) 对脊椎动物的生长和发育至关重要,特别是对鱼类在生命早期的转化进行调节.
- 监测跨发育阶段的TH变化,可以了解转型调节和鱼类发育.
- 准确量化TH (甲状腺素 - T4,三甲状腺素 - T3,反向三甲状腺素 - rT3) 对于理解这些过程至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种高度敏感的方法来量化湖 (Acipenser fulvescens) 组织中的T4,T3和rT3.
- 应用该方法来分析TH水平在湖的各种早期发育阶段.
- 提供一个工具,用于对不同生命阶段的TH进行比较分析,以帮助保护和水产养殖的努力.
主要方法:
- 酶性消化和蛋白质沉用于样本提取.
- 液体-液体提取 (LLE) 和固体提取 (SPE) 使用SampliQ OPT弹进行清洗.
- 液体染色学双重质谱法 (LC-MS/MS) 用于对TH化合物的敏感量化.
主要成果:
- LC-MS/MS方法显示出高灵敏度,检测极限 (LOD) 和量化极限 (LOQ) 低于10 pg/mL.
- 方法验证显示,组织样本的准确度 (78.3-111.2%),精度 (0.1-4.9%) 和恢复率 (41.2-69.0%) 非常好.
- 对T4,T3和rT3的量化成功地从蛋到幼年阶段 (11-74dpf) 的湖进行了量化.
结论:
- 一种经过验证,高度敏感的LC-MS/MS方法可以在早期发展过程中准确地量化湖的TH.
- 这种方法对于理解甲状腺激素在鱼变形和发育中的作用至关重要.
- 开发的方法可以适应在其他农业或保护性重要水生物种中进行TH分析.
