通过SIX1+PAX3+识别hPSCs中的肌性血统承诺的祖先
Olga G Jaime1,2, Jessica Arias1, Shreya Pavani1
1Department of Physiology and Biophysics, School of Medicine, University of California, Irvine, Irvine, CA 92697, USA.
Development (Cambridge, England)
|June 27, 2023
概括
识别SIX1+PAX3+联合表达是骨肌前体细胞 (SMPC) 与人类多能干细胞 (hPSCs) 差异化的关键. 操纵SIX1和其他因素可以增强肌体承诺和骨肌肉发育.
科学领域:
- 发育生物学是发展生物学.
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 分子遗传学 分子遗传学
背景情况:
- 来自人类多能干细胞 (hPSCs) 的骨肌原生细胞 (SMPCs) 具有挑战性,难以早期识别.
- 定义早期的转录检查点对于有效的hPSC分化到骨肌肉至关重要.
研究的目的:
- 识别hPSC差异化中的肌源性承诺的早期标志物.
- 研究SIX1在骨肌肉发育中的作用.
- 建立改善hPSC衍生骨肌生成的方法.
主要方法:
- 在人类胚胎和hPSC差异化中分析肌源性因素.
- 通过CRISPR干扰 (dCas9-KRAB) 抑制hPSC中的SIX1表达.
- RNA测序 (RNA-seq) 来比较SIX1在不同发育阶段的表达.
- 优化差异化条件 (播种密度,代谢监测,CHIR99021度).
主要成果:
- 鉴定出SIX1+PAX3+联合表达是肌肉形成的一个关键指标.
- 早期的SIX1抑制减少了PAX3表达,PAX7+ SMPCs,以及随后的肌管形成.
- 优化的分化条件改善了SIX1+PAX3+前体的出现和非肌原性血统的共同出现.
- 在人类发育过程中,SIX1表达是保留的,但其辅因子表达是发育调节的.
结论:
- 在hPSC分化过程中,SIX1在早期肌源性承诺中起着至关重要的作用.
- SIX1+PAX3+联合表达作为骨肌肉发育的可靠标志物.
- 优化的协议提高了从hPSCs生成骨肌肉的效率,提供了宝贵的资源.
