一个化学发光酶免疫测试基于生物化纳米体和斯特雷普塔维丁放大用于Diazinon敏感量化

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 免疫传感器 免疫传感器

背景情况:

• 纳米体 (Nb) 为开发敏感和稳定的免疫传感器平台提供了优势,因为它们的物理化学特性和易于基因改造.
• 迪亚津 (DAZ) 是一种广泛使用的有机杀虫剂,因此需要可靠的方法来检测其在食品中的含量.
• 现有的检测方法可能缺乏常规分析所需的灵敏度,稳定性或方便性.

研究的目的:

• 开发和验证一种新型的间接竞争性化学发光酶免疫试验 (ic-CLEIA) 用于对氨酸 (DAZ) 的敏感和特定量化.
• 在免疫测试平台内利用生物化抗DAZ纳米体 (Nb-EQ1) 进行增强信号放大.
• 评估开发的ic-CLEIA在蔬菜样本中用于DAZ测定的性能.

主要方法:

• 用体显示技术获得具有高亲和度和特异性的抗DAZ纳米体 (Nb-EQ1).
• 分子对接被用来阐明Nb-EQ1和diazinon之间的相互作用机制.
• Nb-EQ1被生物化以产生双功能Nb-生物素,形成ic-CLEIA的基础.
• 在ic-CLEIA中,用于DAZ量化中的信号放大,使用了生物素-链维丁系统.

主要成果:

• 开发的ic-CLEIA显示了对diazinon检测的高特异性和灵敏性,其线性范围为0.12-25.96 ng/mL.
• 对菜样本的分析显示,平均恢复率在85.7%至113.9%之间,变化系数在4.2%至19.2%之间.
• 使用ic-CLEIA获得的结果与参考气体染色体质谱法 (GC-MS) 方法 (R2 ≥0.97) 得到的结果相对应得很好.

结论:

• 基于生物化Nb-EQ1和链杆菌素识别的ic-CLEIA是量化蔬菜中diazinon的一个方便和有效的工具.
• 纳米体的使用为开发用于农药残留分析的强大和敏感的免疫传感器提供了一个有希望的方法.
• 这种方法为监测农产品中氨酸水平提供了可靠的替代方案,确保了食品安全.