开发热稳定的纳米体,用于检测和中和葡萄球菌肠毒素B
Anna C Hughes1, Marina Kirkland1, Wenxian Du1
1Western Regional Research Center United States Department of Agriculture, Agricultural Research Service, 800 Buchanan St., Albany, CA 94710, USA.
Toxins
|June 27, 2023
概括
新的葡萄球菌肠毒素B (SEB) 反应纳米体提供了敏感,特异和稳定的检测. 这些纳米体还可以中和SEB活动,为食品安全应用提供了多功能工具.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 葡萄球菌肠毒素B (SEB) 是一种强有力的毒素,会引起食物传播疾病.
- 目前的SEB检测方法可能缺乏灵敏度或稳定性.
- 由于其独特的特性,纳米体为传统抗体提供了一个有希望的替代品.
研究的目的:
- 开发和表征新的SEB反应性纳米体.
- 建立高度敏感的酶链接免疫吸收试验 (ELISA) 用于SEB检测.
- 评估开发的纳米体的热稳定性,保质期和中和能力.
主要方法:
- 开发16个独特的SEB特定纳米体 (单价和双价).
- 建立基于纳米体的ELISA用于在缓冲剂和添加剂的牛奶中检测SEB.
- 评估纳米体的耐热性和储存稳定性.
- 使用ex vivo人类外周血液单核细胞 (PBMC) 试验评估SEB中和活性.
主要成果:
- 所有开发的纳米体都对SEB具有高度的特异性.
- 基于纳米体的ELISA可以达到低至50 pg/mL (PBS) 和190 pg/mL (牛奶) 的检测极限.
- 纳米体价值与增加的ELISA灵敏度相关.
- 一些纳米体 (SEB-5,SEB-9,SEB-6) 显示出显著的热稳定性 (在95°C后保持10分钟的活性).
- 纳米体表现出良好的保质期,在室温下两周后,SEB-9在室温下保持93%的活性.
- 在15个测试的纳米体中,有11个中和了SEB的超抗原活性.
结论:
- 对SEB反应的纳米体为SEB检测提供了一个敏感,特定和稳定的平台.
- 与传统抗体相比,基于纳米体的测试在热稳定性和生产方便性方面具有优势.
- 这些纳米体在食品中具有成本效益高的SEB污染管理的巨大潜力.
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