在多光谱显微镜之间比较和纠正光谱敏感性:临床实施的先决条件
Margaret Eminizer1,2, Melinda Nagy1,2, Elizabeth L Engle3,4,5
1Department of Physics and Astronomy, Johns Hopkins University, Baltimore, MD 21210, USA.
Cancers
|June 28, 2023
概括
标准化多谱,多重免疫光 (mIF) 显微镜对于可重复诊断至关重要. 一个简单的校准模型显著减少了不同显微镜的图像变化,增强了临床病理学的应用.
科学领域:
- 生物医学成像技术 生物医学成像技术
- 病理学 病理学 病理学
- 计算生物学 计算生物学
背景情况:
- 多光谱,多重免疫光 (mIF) 显微镜能够在组织中进行详细的细胞分析.
- 在不同的显微镜中,mIF图像数据的可复制性和标准化对于诊断应用至关重要.
- 当前的mIF技术需要强大的方法来确保一致的数据质量.
研究的目的:
- 描述和纠正不同mIF显微镜之间照明强度和光谱灵敏度的变化.
- 开发和验证用于标准化mIF图像数据的校准模型.
- 评估标准化对减少图像变化和提高标记表达精度的影响.
主要方法:
- 在三个不同的mIF显微镜上扫描了8个黑色素瘤组织样本.
- 计算平均组织区域流量强度以确定基线变化.
- 应用特定于样品,特定于显微镜的校准模型来纠正亮度和光谱差异.
- 在独立样本子集上验证校准模型.
主要成果:
- 显微镜的基线平均标准偏差为29.9%,在初始校正后降至13.9%.
- 校准模型的应用使验证子集的变化减少到2.9 ± 0.03%.
- 在未混合标记物表达的变化在经过校正后从15.8%降至4.4%.
结论:
- 一个简单的校准模型可以有效地标准化mIF显微镜.
- 标准化显著减少了图像数据的变化,提高了可重现性.
- 标准化mIF显微镜对于临床病理学实验室来说是可行的.
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