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Updated: Jul 25, 2025
05:57
In Vitro Assay of Bacterial Adhesion onto Mammalian Epithelial Cells
Published on: May 16, 2011
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细胞粘附分子在E.中的表达. 大肠杆菌:一种高吞吐量查,以识别类似细胞调节器
Jay Rollins1, Tyler Worthington1, Allison Dransfield1
1Department of Cell Biology and Physiology, College of Life Sciences, Brigham Young University, Provo, UT 84602, USA.
International journal of molecular sciences
|June 28, 2023
概括
研究人员对大肠杆菌进行了基因工程,使其表达克劳迪因 (CLDNs),从而导致多细胞聚合. 这种新的ICLASP方法使得能够对调节密集结 (TJ) 和细胞透性的小分子进行高通量选.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 微生物学 微生物学
背景情况:
- 细胞粘附分子 (CAMs) 调解关键的细胞相互作用.
- 紧接点 (TJs) 调节细胞透性,没有当前的治疗调节器.
- 克劳丁 (CLDNs) 是TJs的关键蛋白质组成部分.
研究的目的:
- 开发一种新的高通量选 (HTS) 方法来识别TJ调节器.
- 在细菌系统中研究CLDNs的功能表达.
- 选调节CLDN2-介导的细胞透性的小分子.
主要方法:
- 经过工程改造,使大肠杆菌在其外膜中表达CLDN蛋白质.
- 使用流细胞计 (FC) 来量化由CLDN表达诱导的细菌聚合.
- 开发了ICLASP (通过FC协议检查细胞粘附分子聚合) HTS方法.
- 在哺乳动物A549细胞系中验证识别的化合物.
主要成果:
- 在大肠杆菌中诱导的CLDN表达改变了从单细胞聚合到多细胞聚合的行为.
- 通过ICLASP方法成功实现了CAM相互作用的HTS.
- 确定了对CLDN2.2的潜在细胞模拟器.
- 在哺乳动物细胞系中证明了iCLASP的概念证明.
结论:
- 细菌表达的CLDNs提供了一个新的平台来研究CAMs.
- iCLASP是一种有效的HTS方法,用于发现TJ和细胞透度调节器.
- 这种方法对开发针对TJs的新疗法充满希望.
