快速核酸可视化检测用于感染性牛鼻炎病毒,该病毒向TK基因
Ruijia Wang1, Pei Huang1, Zanheng Huang1
1State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Severe Zoonotic Infectious Diseases, Key Laboratory for Zoonosis Research of the Ministry of Education, Institute of Zoonosis, and College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun, China.
Microbiology spectrum
|June 29, 2023
概括
开发了一种新的快速,简单和准确的测定方法来检测传染性牛鼻炎病毒 (IBRV). 这种带有垂直流 (RPA-VF) 的重组聚合酶放大试验可方便在牛场现场检测IBRV.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 控制和控制畜牧业疾病
背景情况:
- 传染性牛鼻炎病毒 (IBRV) 导致牛的呼吸,生殖和全身疾病.
- 持续和潜伏的IBRV感染对农场管理构成挑战,并在全球范围内造成重大经济损失.
- 由于缺乏快速准确的诊断方法,牛感染性鼻炎 (IBR) 的有效控制和根除策略受到阻碍.
研究的目的:
- 开发一种快速,简单和准确的诊断方法来检测IBRV.
- 促进牛群中IBR的及时控制和根除.
- 为在农场环境中检测IBRV提供现场测试解决方案.
主要方法:
- 开发一种重组聚合酶放大与垂直流 (RPA-VF) 试验,准IBRV胆胺激酶 (TK) 基因.
- 测试优化以在25分钟内在42°C快速检测.
- 使用阳性等离子体DNA和IBRV量化50%组织培养感染剂量 (TCID50) 的验证.
- 用通过简单的热溶解方法 (95°C5分钟) 提取的DNA测试临床样本.
主要成果:
- RPA-VF测定检测到只有3.8 × 10^1副本/μL的等离子体DNA和IBRV.50的1.09 × 10^1TCID50.
- 该试验对IBRV具有高特异性,对其他常见的牛呼吸道病原体没有交叉反应.
- 在RPA-VF测定和黄金标准诊断方法之间观察到100%的一致性.
- 该试验在简单的热提取后在临床样本中成功检测到IBRV,从而使其能够在现场应用.
结论:
- 开发的RPA-VF测定是一种敏感,特定和临床适用的IBRV检测工具.
- 这种方法为牛场的IBRV提供了快速的现场诊断能力.
- RPA-VF测定有助于对IBRV的控制和根除工作.
