分子克隆,核细胞表达及其应用潜力的评估干扰素 (IFN) -ω的森林香鹿的分子克隆
Xi Wu1, Wei Yang1, Jian-Guo Cheng2
1College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, 611130, Sichuan Province, China.
Scientific reports
|June 30, 2023
概括
研究人员开发了一种复合森林香鹿干扰素-欧米茄 (fmdIFNω) 蛋白质,以研究其抗病毒潜力. 这种蛋白质成功地刺激了细胞中的免疫基因,并使鹿中自然fmdIFNω水平的检测成为可能,有助于控制疾病.
科学领域:
- 兽医免疫学 兽医免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 保护医学 保护医学
背景情况:
- 森林香鹿 (Moschus berezovskii) 面临着保护方面的挑战,原因是囚禁种群的健康问题.
- 干扰素-欧米茄 (IFN-ω) 在对病毒感染的天生的免疫力中起着至关重要的作用.
- 了解IFN-ω的功能对于开发威胁物种疾病控制策略至关重要.
研究的目的:
- 为了获得和描述森林香鹿干扰素-欧米茄 (fmdIFNω) 基因序列.
- 为了表达和评估复合fmdIFNω (rIFNω) 蛋白质的生物活性.
- 建立一种检测森林鹿内源IFN-ω水平的方法.
主要方法:
- 同源克隆被用来获得5个fmdIFNω基因序列.
- 复合fmdIFNω蛋白 (rIFNω) 通过一种 prokaryotic 系统 (pGEX-6P-1等离子体和大肠杆菌) 来表达.
- 在森林香鹿肺纤维细胞 (FMD-C1细胞) 中测试了rIFNω蛋白对干扰素刺激基因 (ISG) 的作用.
- 使用抗-rIFNω血清的间接ELISA方法被开发用于量化内源IFN-ω.
主要成果:
- 确定了五种fmdIFNω亚型,其结构与I型IFN和Cervus elaphus IFN-ω相似.
- 表达的rIFNω (48kDa) 显著上调了FMD-C1细胞中的ISG转录,以时间依赖的方式.
- 开发的ELISA检测到鹿血清中的天然IFN-ω,较高的水平与更严重的症状相关.
结论:
- 重组fmdIFNω具有抗病毒潜力,可以刺激先天免疫反应.
- 基于rIFNω的ELISA是监测森林鹿内源IFN-ω水平的可行工具.
- 这些发现对于开发治疗策略和早期疾病诊断对于森林香鹿保护具有重要意义.
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