实验室进化Synechocystis sp. 的实验室演变 PCC 6803用于烯胺生产
Kateryna Kukil1, Elias Englund2, Nick Crang2
1Microbial Chemistry, Department of Chemistry - Ångström, Uppsala University, Box 523, SE 751 20, Uppsala, Sweden.
Metabolic engineering
|July 1, 2023
概括
菌被改造成耐氨酸的突变物 (PRM),可以有效分泌氨酸. 这些PRM,特别是PRM8,在与代谢工程相结合时,也显示出高酸和酸的产量.
科学领域:
- * 生物技术 * 生物技术
- * 代谢工程 代谢工程
- * 合成生物学 * 合成生物学
背景情况:
- * 蓝藻是生产工业相关化合物的宝贵平台,如芳香氨基酸和氨基酸.
- * 开发高效的微生物细胞工厂对于可持续的化学生产至关重要.
研究的目的:
- * 为了产生和描述 Synechocystis sp. 的氨抗性突变菌株 (PRMs). 在PCC 6803中.
- * 评估这些PRM在生产氨酸,跨酸 (tCA) 和副酸 (pCou) 的潜力.
主要方法:
- * 实验室进化Synechocystis sp. 的实验室演变 PCC 6803 在氨选择压力下.
- *高密度培养 (HDC) 用于评估氨分泌和下游化合物生产.
- * 过度表达氨氨酸氨解酶 (PAL) 和氨酸氨解酶 (TAL).
- * 突变菌株的基因组测序以确定遗传修饰.
主要成果:
- *所有生成的PRM菌株都将氨酸分泌到介质中.
- *PRM8表现出最高的特异性氨酸产量 (24.9 mg L-1·OD 750-1).
- *在PAL或TAL表达的PRM8中,在HDC中获得了tCA和pCou的高标位 (>1g L-1).
- * 在所有PRM中发现了编码DAHP合成酶的ccmA基因的突变.
结论:
- *实验室进化对于开发具有增强生产能力的蓝藻菌株是有效的.
- *将进化突变物与代谢工程结合起来,显著提高了有价值化合物的产生.
- * 综合囊 sp. 这种病. PCC 6803,特别是PRM8,是生产烯胺的有前途的底盘.
