循环RNA SCAR 改善了视网膜微血管内皮细胞中高葡萄糖诱导的线粒体功能障碍和透性损伤

科学领域:

• 眼科医生 眼科 眼科
• 分子生物学分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 糖尿病视网膜病变是视力丧失的主要原因,其特征是对视网膜微血管内皮细胞的损伤.
• 高水平的葡萄糖会诱导氧化应激,线粒体功能障碍和这些细胞中的障碍完整性受损.
• 循环RNAs (circRNAs) 在糖尿病视网膜病变的发病过程中的作用仍然不完全理解.

研究的目的:

• 为了研究circRNA SCAR在暴露于高葡萄糖的人类视网膜微血管内皮细胞 (hRMVECs) 中的作用和机制.
• 在高葡萄糖条件下确定circRNA SCAR对hRMVEC细胞增殖,氧化应激,线粒体功能和细胞透性的影响.

主要方法:

• 定量实时聚合酶连锁反应 (qRT-PCR) 用于测量circRNA SCAR表达和mtDNA拷贝数.
• 细胞计数工具-8 (CCK-8) 试验用于评估细胞活力和增殖.
• 测量反应性氧物种 (ROS),甲 (MDA),腺三酸盐 (ATP) 和抗氧化酶活动 (SOD,CAT).
• 西部斑点分析用于评估线粒体蛋白质 (Drp1,Fis1) 和紧结蛋白质 (claudin-5,ocludin,ZO-1) 的蛋白质表达水平.

主要成果:

• 高血糖显著降低了循环RNA SCAR表达的调节,并抑制了hRMVEC的扩散.
• 在高葡萄糖下,circRNA SCAR的过度表达促进了hRMVEC的扩散.
• 循环RNASCAR过度表达降低了ROS和MDA水平,增加了ATP水平,并增强了SOD和CAT活动.
• circRNA SCAR过度表达逆转了高葡萄糖诱导的mtDNA拷贝数量的减少,并使线粒体和紧结蛋白的表达正常化.

结论:

• circRNA SCAR在hRMVEC中起着保护作用,防止高葡萄糖诱导的损伤.
• circRNA SCAR促进了hRMVEC的扩散,减轻了氧化应激,并改善了线粒体功能和屏障完整性.
• circRNA SCAR代表了糖尿病视网膜病变的潜在治疗标.