基于免疫试验的定量定量人体血中全长的丁糖氨酸α-amidating单氧酶
Yulia Ilina1, Paul Kaufmann2, Olle Melander3,4
1PAM Theragnostics GmbH, Neuendorfstr. 15A, 16761, Hennigsdorf, Germany. yulia.ilina@pam-t.com.
Scientific reports
|July 4, 2023
概括
一种新的试验量化了人体血中的双功能基甘氨酸-α-胺基化单氧酶 (PAM). 这种工具准确地测量了PAM,这对于激活激素至关重要,并且适用于大规模的人口研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 内分泌学 在内分泌学.
- 测试开发 测试开发
背景情况:
- 基甘氨酸α-胺基化单氧酶 (PAM) 对于通过C端α-胺基化激活超过一半已知的激素至关重要.
- 准确量化全长PAM对于理解其在生理和病理过程中的作用至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种敏感和特定的一步三明治化学发光免疫测定 (LIA) 测量人类血PAM.
- 评估试验的性能特征,包括灵敏度,精度,准确性,线性和稳定性.
- 评估开发的试验和酶活性之间的相关性,以及其在人群研究中的适用性.
主要方法:
- 一个单阶段的三明治化学发光免疫测定 (LIA) 设计使用针对PAM的PHM和PAL子单元的抗体.
- 测试校准使用人类重组PAM酶进行.
- 验证包括评估检测和量化极限,测试间和测试内部的变异性,线性,精度 (尖端回收),物质干扰和样本矩阵效应.
主要成果:
- 在PAM-LIA试验中,检测极限为189 pg/mL,量化极限为250 pg/mL.
- 在测试间 (6.7%) 和测试内 (2.2%) 的变化中观察到非常好的精度.
- 该测试显示了高精度 (94.7%),良好的线性,稳定性 (96%经过6个结解周期),以及与不同样品类型 (EDTA,血清,-氨酸) 的强相关性.
- 在α-amidating活性和PAM-LIA结果之间发现了很高的相关性.
- 该试验在一个基于人群的研究中成功应用于4850个人,证实了其适用于高通量查的适用性.
结论:
- 开发的PAM-LIA是一种强大,敏感和特定的测定方法,用于量化全长人体血PAM.
- 该试验的性能特征和与酶活性的相关性支持其在临床研究和诊断中的实用性.
- 在大型人口研究中的成功应用突显了其在例行高通量查和流行病学研究方面的潜力.
