在C57BL/6小鼠中使用LL-37抗微生物向特定和高效的CRISPR/Cas9系统的系统输送,该系统向HPV16瘤基因,使用LL-37抗微生物向C57BL/6小鼠输送

科学领域:

• 在瘤学瘤学.
• 分子生物学分子生物学
• 基因治疗 基因治疗

背景情况:

• 人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型是导致子宫癌的主要原因.
• CRISPR/Cas9基因编辑为癌症治疗提供了一个有前途的新疗法策略.

研究的目的:

• 设计和评估CRISPR/Cas9基因编辑,以向HPV16瘤基因 (E5,E6,E7) 和p97促进体.
• 在瘤细胞中评估CRISPR/Cas9输送使用Lipofectamine 2000和LL-37的疗效.
• 在小鼠模型中研究CRISPR/Cas9基因编辑对先前存在的HPV16诱导瘤的治疗潜力.

主要方法:

• 针对CRISPR/Cas9针对HPV16.6的指导RNA (gRNA) 序列的in silico设计.
• 使用Lipofectamine 2000和LL-37将重组载体输入C3,TC1和HeLa细胞.
• 细胞循环蛋白 (p21,p53,Rb) 和免疫组织化学 (IHC) 的西部斑分析,用于瘤组织中切割的caspase-3和线粒体指数.
• 用基因编辑载体和西斯丁治疗的C57BL/6小鼠的瘤大小减小和存活率的评估.

主要成果:

• 针对CRISPR/Cas9的E6+E7治疗在小鼠中显示出显著的瘤减少.
• 这组表现出高百分比的割裂caspase-3阳性细胞 (45.75%) 和低的线粒体指数 (2-3),表明有效的瘤细胞亡.
• 在克服CRISPR/Cas9传递挑战方面,LL-37抗菌被证明是有效的,标志着一种新的应用.

结论:

• 通过CRISPR/Cas9进行基因编辑是一种有效,特定且无毒的方法,用于向先前存在的HPV16诱导的瘤.
• 这项研究强调了LL-37作为CRISPR/Cas9基因疗法的传递增强剂的潜力.
• 使用CRISPR/Cas9的精确基因疗法为未来的癌症患者治疗提供了光明的前景.