细胞系开发使用向基因整合到MAR丰富的着陆中,以稳定表达转基因
Claudia Oliviero1, Steffen C Hinz1, Julius Grzeschik2
1Institute of Life Technologies, Haute Ecole d'Ingénierie HES-SO Valais Wallis, Sion, Switzerland.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|July 5, 2023
概括
使用富含矩阵附着区域 (MAR) 的着陆 (LPs) 进行向基因整合,可以在特定地点同时将多个感兴趣的基因 (GOI) 插入哺乳动物细胞. 这种方法通过减少细胞系发育时间表和改善克隆的一致性来加速生物治疗生产.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞线发展发展 细胞线发展
背景情况:
- 用于生物治疗的哺乳动物细胞系开发依赖于整合感兴趣的基因 (GOI).
- 随机集成方法往往导致异质性和更长的开发时间表.
- 有针对性的基因整合提供了一个更有效和更一致的方法.
研究的目的:
- 描述生成具有矩阵附着区域 (MAR) 丰富的着陆 (LPs) 的宿主细胞系的协议.
- 为了实现多个政府部门的特定地点和同时集成.
- 为了促进更快,更一致的细胞系发展,用于生物治疗生产.
主要方法:
- 产生含有富含MAR的着陆 (LPs) 的宿主细胞系.
- 在LP中纳入BxB1重组位.
- 将多个政府部门的特定地点整合到LP中.
主要成果:
- 成功生成了具有集成LP的稳定细胞系.
- 证明了多个政府部门的特定地点和同时集成.
- 生产了稳定的重组克隆,表达了用于抗体生产的转基因.
结论:
- 具有重组位点的富含MAR的LP提供了针对性基因集成的高效平台.
- 这种方法显著减少异质性,缩短细胞系发育的时间表.
- 开发出来的细胞系适合生产单种或多种特异性抗体.
