优化THP-1巨细胞培养用于免疫响应的人类肠道模型
Pornwipa Phuangbubpha1, Sanya Thara1, Patsawee Sriboonaied1
1Department of Biology, Faculty of Science, Silpakorn University, Nakhon Pathom 73000, Thailand.
Cells
|July 6, 2023
概括
这项研究引入了一种新的21天的三重共同培养模型,使用差异化的THP-1巨细胞 (THP-1m) 来研究长期肠道免疫反应. 该模型成功模仿炎症,并保持肠道屏障的完整性.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 胃肠病学 胃肠病学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 现有的巨共同培养模型由于长期培养中的巨脱差而面临局限性.
- 开发稳定,长期的免疫反应模型对于研究慢性肠道疾病至关重要.
研究的目的:
- 建立和验证一种新型的长期 (21天) 三重共同培养模型,涉及THP-1巨细胞 (THP-1m),Caco-2肠上皮细胞和HT-29-甲甲酸盐杯细胞.
- 评估在炎症条件下在这种共同培养系统内分化THP-1m的稳定性和免疫反应.
主要方法:
- 高密度的THP-1细胞通过使用博12-米里斯13-乙酸盐分化为THP-1m,并培养长达21天.
- 用Caco-2和HT-29-MTX细胞建立了一个三重共同培养系统.
- 脂多糖被用于诱导炎症状态,并测量了细胞因子水平 (TNF-α,IL-6) 和体电阻 (TEER).
主要成果:
- 在21天的培养期内,差异化THP-1m表现出稳定的形态和溶酶体扩张.
- 在三重共同培养模型中,在脂多糖糖刺激后,瘤坏死因子-α (824.7 ± 130.0 pg/mL) 和介质素-6 (609.7 ± 139.5 pg/mL) 的显著增加.
- 肠膜完整性得到成功维持,TEER值为336.4±18.0 Ω·cm2.
结论:
- 在一个稳定的,长期的三重共同培养模型中,THP-1m可以有效地用于研究肠道免疫反应.
- 该模型适用于调查肠表皮的正常和慢性炎症状态.
- 开发的模型为未来研究免疫系统与肠道健康之间的相互作用提供了有价值的工具.
