基于单克隆抗体的阻断ELISA的开发,用于检测动物的SARS-CoV-2暴露

科学领域:

• 兽医免疫学 兽医免疫学
• 传染病诊断 传染病诊断 传染病诊断
• 动物健康监督 动物健康监督

背景情况:

• 严重急性呼吸道综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2) 构成全球健康风险,影响人类和各种动物物种.
• 准确和灵敏的诊断工具对于控制SARS-CoV-2在动物中的传播至关重要.
• 现有的COVID-19诊断试验通常是针对人类的,因此需要开发适用于动物的试验.

研究的目的:

• 开发和验证基于单克隆抗体 (mAb) 的阻断酶相关免疫吸收试验 (bELISA) 以检测广泛的动物物种中SARS-CoV-2抗体.
• 评估开发的bELISA的诊断性能,可重复性和早期检测能力.
• 为了利用bELISA对表现出COVID-19类症状的物动物进行初步查.

主要方法:

• 开发一组针对SARS-CoV-2核囊蛋白的单克隆抗体小组.
• 建立基于mAb的阻断ELISA (bELISA) 以广泛适用于动物物种.
• 使用已知感染状况的动物血清样本验证bELISA,确定最佳截止值,灵敏度和特异性.
• 通过变化系数分析评估试验可重复性的评估.
• 对实验性感染猫的血清转化检测的评估和对有症状的物动物的查.

主要成果:

• 开发的bELISA表现出高的诊断灵敏度 (97.8%) 和特异性 (98.9%),最佳切断值为17.6%的抑制.
• 该试验表现出极好的可重复性,变化系数低 (7.23%在运行之间,4.89%在运行内,3.16%在盘内).
• 在实验性感染的猫中,感染后7天就检测到了血清转化.
• 在两只患有COVID-19类似症状的狗身上发现了特定抗体反应,这表明该测试在现实世界监测中的实用性.

结论:

• 基于mAb的bELISA是一种高度敏感,特定和可重复的血清学工具,用于在广泛的动物物种中检测SARS-CoV-2抗体.
• 这种测定有助于早期检测感染,并支持有效的动物群体COVID-19监测计划.
• 生成的单克隆抗体和bELISA测定对正在进行的SARS-CoV-2研究和兽医诊断具有宝贵的资源.