一种高效的方法,以原塑为媒介,生产转型的麻豆 (Ricinus communis) 线
Paula Figueroa-Varela1, Danna Susunaga-Gómez1, Catalina Restrepo-Osorio1
1CIBIOP Research Group, School of Applied Sciences and Engineering, EAFIT University, Medellín, Colombia.
BMC research notes
|July 6, 2023
概括
这项研究提出了一种有效的协议,用于隔离,培养和转移来自Ricinus communis叶的原生质. 优化的酶度和化时间确保了高原生质的产量和可用于基因改进的活力.
科学领域:
- 植物生物技术 植物生物技术
- 分子生物学分子生物学
- 农作物改善的方法
背景情况:
- 河豆 (Ricinus communis) 是一种重要的作物,有可能进行遗传增强.
- 有效的植物细胞操纵方法对于推进作物改进战略至关重要.
研究的目的:
- 开发一个强大的协议,以隔离,培养和执行Ricinus communis.中的聚乙烯糖醇 (PEG) 介导的原质细胞转移.
- 为了优化酶的消化和化条件,以获得高的原始质细胞产量和活力.
- 建立一种将等离子体DNA引入Ricinus communis的方法,用于遗传研究.
主要方法:
- 使用特定的酶组合 (细胞酶-R10和麦克罗酶-R10) 从体外培养的Ricinus communis叶子中分离出原生质.
- 优化酶度和化时间,以最大限度地提高原生质的产量和活力.
- 建立聚乙烯糖醇 (PEG) 介导的转染协议,用于将等离子体DNA引入分离的原生体.
主要成果:
- 使用1.6%的细胞酶-R10和0.8%的麦克罗酶-R10与16小时的潜伏期确定了原生质分离的最佳条件,产生481.16 × 10^4原生质/g FW,生存率为95%.
- 酶组成和化时间显著影响了原生质隔离的效率和活力.
- 经过更长的潜伏期,获得了更多的原生质 (8.5 × 10^5原生质/g FW),但生存能力下降.
- 对Ricinus communis.成功建立了一个功能性PEG介导的传染协议.
结论:
- 已经开发出一种简单,高效和可重复的协议,用于Ricinus communis原始细胞的隔离,培养和PEG介导的转染.
- 这种方法促进了基因转换,并有望加速麻豆的基因改进.
- 已建立的协议支持在哥伦比亚种植的Ricinus communis基因型的基因工程方面的进展.
