评估离子对逆相,离子交换和水友相互作用液体色谱之间的正交相性,用于合成寡核酸的分离
Matthew J Sorensen1, Mellie June Paulines1, Todd D Maloney1
1Synthetic Molecule Design and Development, Lilly Research Labs, Eli Lilly and Company, Indianapolis, IN 46285, United States.
评估了对寡核酸杂质的染色学方法的正交性. 合水友互动液态色谱 (HILIC) 与离子交换 (AEX) 或离子对逆相色谱 (IP-RP) 提供了对杂质分析的最高正交度.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 染色体学 染色体学 是一种染色学.
- 生物制药学分析
背景情况:
- 氧核酸治疗药物需要强大的分析方法来进行杂质分析.
- 正角分离技术对于全面的表征至关重要.
- 离子对逆相 (IP-RP),离子交换 (AEX) 和水友相互作用液体色谱 (HILIC) 是常见的方法.
研究的目的:
- 为了评估IP-RP,AEX和HILIC对寡核酸杂质分离的正交.
- 为了确定最佳的染色学组合,以进行增强的寡核酸分析.
主要方法:
- 使用聚胺梯和模型23-mer合成寡核酸的IP-RP,AEX和HILIC的评估.
- 对常见杂质的选择性差异的评估,包括切断,添加,氧化和脱.
- 三种染色学模式的保留时间和分辨率的比较.
主要成果:
- 最初的评估显示,与聚胺的正交度为零,保留基于电荷/大小.
- 将HILIC与AEX或IP-RP合显示出最高的正交度,这是由于水友成分的差异性保留.
- IP-RP提供了最高的整体分辨率,而HILIC和AEX则显示出更多的共解.
结论:
- HILIC具有独特的选择性,并且与AEX或IP-RP结合用于寡核酸杂质分析时,是一种有价值的正交技术.
- 涉及HILIC的多维分离显示出复杂的寡核酸混合物的潜力.
- 对不同类型的寡核酸和其他生物治疗药物需要进一步的研究.
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