研究笔记:检测坎比洛巴克特菌种类. 在肉中使用培养方法和量化PCR与一氧化
Ayaka Okada1, Mizuki Tsuchida2, Kazuha Aoyagi2
1Laboratory of Food and Environmental Hygiene, Cooperative Department of Veterinary Medicine, Faculty of Applied Biological Sciences, Gifu University, Gifu 501-1193, Japan; Education and Research Center for Food Animal Health, Gifu University (GeFAH), Gifu 501-1193, Japan.
单酸定量PCR (PMA-qPCR) 和培养方法可以检测出Campylobacter spp. 在肉中也是如此,但它们的结合可能会提高检测率. 可行但不可培养 (VBNC) 坎皮洛巴克特检测需要进一步的研究.
科学领域:
- 食品安全微生物学 食品安全微生物学
- 分子检测方法 分子检测方法.
- 食物传播的细菌病原体.
背景情况:
- 坎比洛巴克特 spp. 的种类. 在全球范围内,是导致食源性胃肠炎的主要原因.
- 传统的培养方法无法检测出可生存但不能培养的 (VBNC) 坎皮洛巴克.
- 在和人类疾病峰值检测Campylobacter之间的差异表明当前方法的局限性.
研究的目的:
- 为了比较可行的Campylobacter spp.的检测率. 在肉中使用PMA-qPCR和常规培养方法,跨越四个季节.
- 调查PMA-qPCR在肉中检测活性的坎皮洛巴克特,包括VBNC形式的潜力.
- 评估季节性坎皮洛巴克特检测率与人类坎皮洛巴克特菌病发病率之间的相关性.
主要方法:
- 使用PMA-qPCR和培养方法选了105个肉样本 (全腿,乳头片,肝脏).
- 量化PCR测定用甲酸 (PMA-qPCR) 来区分可活和死亡的坎皮洛巴克特细胞.
- 在不同季节中对PMA-qPCR和培养方法之间的检测率进行比较分析.
主要成果:
- 在PMA-qPCR和培养方法之间,总体检测率没有显著差异.
- 在这两种方法中,积极和消极样本的识别不一致.
- 与其他月份相比,3月观察到明显较低的检测率.
- 在肉样本中,PMA-qPCR在检测VBNCCampylobacter jejuni的有效性有限.
结论:
- 同时使用PMA-qPCR和培养方法可能会增强Campylobacter spp. 在肉中检测到.
- 目前的PMA-qPCR方法不足以有效检测VBNC的Campylobacter.
- 需要进一步开发可行性-qPCR测定,以了解VBNC Campylobacter对食品安全的影响.
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