使用RNP和HNSCC细胞的脂化作用生成单克隆CRISPR-Cas9介导的淘汰细胞系的协议
Fabian Geyer1, Maximilian Geyer1, Sarah Klapproth2
1Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, 81675 Munich, Germany.
STAR protocols
|July 8, 2023
概括
这项研究详细介绍了CRISPR-Cas9协议,用于创建淘汰细胞系. 它涵盖了指导设计,核糖核蛋白复合体的输送,以及在HNSCC细胞中单克隆细胞系的验证.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因组学就是基因组学.
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 克里斯普尔-Cas9技术提供了精确的基因组编辑能力.
- 产生稳定的淘汰细胞系对于功能基因组学研究至关重要.
研究的目的:
- 为生成单克隆淘汰细胞系提出一个全面的协议.
- 为了优化CRISPR-Cas9,核糖核蛋白复合体和HNSCC细胞的脂化作用.
主要方法:
- 关于CRISPR-Cas9.9的指南和基础设计.
- 核蛋白复合物的制备和脂化.
- 单细胞克隆,PCR,DNA净化和细胞系验证.
主要成果:
- 建立了一个完整的工作流程,用于生成单克隆淘汰细胞系.
- 该协议针对附着的HNSCC细胞进行了优化.
结论:
- 该协议提供了一种可靠的方法,用于创建经过验证的单克隆淘汰细胞系.
- 它促进了头部和部状细胞癌研究中的功能研究.
