在性pH值下,二硫化物形成化物,导致冷溶解方法中的潜在高估
Dayana Benchoam1, Ernesto Cuevasanta2, Jonathan A Semelak3
1Laboratorio de Enzimología, Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad de la República, Montevideo, 11400, Uruguay; Centro de Investigaciones Biomédicas (CEINBIO), Universidad de la República, Montevideo, 11800, Uruguay; Graduate Program in Chemistry, Facultad de Química, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay.
谷氨二硫化物 (GSSG) 的性处理形成了谷氨二硫化物 (GSSH) 和其他硫化合物. 在使用冷溶解时,这种反应可能会高估硫硫,这凸显了在性pH下涉及二硫化物的实验中需要谨慎.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 化学动力学 化学动力学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 蛋白质和通过性条件下的β-消除释放硫.
- 这一过程形成了硫化物和脱氨衍生物.
研究的目的:
- 在性条件下,评估从二硫化 (GSSG) 中形成的谷氨二硫化 (GSSH).
- 为了研究这种反应的动力学和副产品.
主要方法:
- 紫外线-Vis吸收光谱光度计
- 与5.5'-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid) (DTNB) 的反应
- 寒冷的分解是什么?
- 高性能液体染色学 (HPLC) 是一种高性能液体染色学.
- 质谱测量质量谱测量
主要成果:
- 在25°C时,GSSG与氧化离子 (HO-) 反应,其明显的二次速率常数为~10^-3 M^-1 s^-1.
- 证实了GSSH和脱水氨酸衍生物的形成.
- 混合物在几个小时内无法平衡;形成了额外的硫和硫化合物.
- 由于二硫化物衰变,冷溶解在含有GSSG的样本中高估了硫硫.
结论:
- 二硫化物的β-消除是硫化物的潜在来源.
- 不建议在中从GSSG制备GSSH.
- 在执行和解释涉及二硫化物的冷溶解实验时,需要谨慎.
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