一个多功能基因组转基因平台,用于人类Expi293F细胞的增强λ整合酶
Asim Azhar Siddiqui1, Sabrina Peter1, Eve Zi Xian Ngoh2
1School of Biological Sciences, Nanyang Technological University, Singapore, Singapore.
Frontiers in bioengineering and biotechnology
|July 10, 2023
概括
我们开发了一个使用 λ 整合酶的新型转基因平台,用于在人类细胞中稳定地插入转基因. 这使得可靠的,长期的生物治疗试验和生产,没有选择压力.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 可靠的基于细胞的平台对于生物制药的开发至关重要.
- 现有的方法可能会受到转基因不稳定性和表达变化的影响.
研究的目的:
- 为人类Expi293F细胞开发一种新的,稳定的转基因平台.
- 为了实现可靠的长期测试和生物制剂的生产.
- 为了证明平台对单克隆抗体表达的实用性.
主要方法:
- 利用增强的λ整合酶用于特定位点的DNA重组.
- 建立了一个特征单个基因组位置作为人工着陆台.
- 插入了用于抗PD-1单克隆抗体表达的多转基因结构.
主要成果:
- 在没有选择压力的情况下实现了稳定的转基因插入.
- 没有观察到转基因不稳定性或表达变异.
- 证明了转录单元的方向会影响抗体表达水平.
- 在迷你生物反应器中成功封装工程细胞,以持续分泌抗体.
结论:
- 开发的平台为转基因整合提供了稳定可靠的方法.
- 这项技术有助于长期的生物治疗试验和生产.
- 该平台为未来的基因组工程应用和改进的基于细胞的疗法提供了模块化.
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