在Limosilactobacillus reuteri中进行电穿孔和转化确认的方法 DSM2001616 DSM2001616
Alexander Duggan1, David McMillen2
1University of Toronto Mississauga.
Journal of visualized experiments : JoVE
|July 10, 2023
概括
这项研究提供了用于操纵Limosilactobacillus reuteri DSM20016,合成生物学关键细菌的标准化协议. 这些方法简化了等离子体转化和记者蛋白质分析,对于新研究该菌株的研究人员来说.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 合成生物学 合成生物学
- 细菌遗传学 细菌遗传学
背景情况:
- 乳杆菌属很大,多样化,最近的重新分类创造了23个新属.
- 属内的变异意味着一个菌株的协议可能不适用于其他菌株.
- 缺乏集中式协议使研究人员的菌株操纵变得复杂.
研究的目的:
- 为了集中成功的Limosilactobacillus reuteri菌株F275 (DSM20016) 的协议.
- 为操纵过程中遇到的常见问题提供故障排除建议.
- 为了使研究人员能够转化等离子体,确认转化,并测量记者蛋白反.
主要方法:
- 等离子体转换协议.
- 转换确认技术.转换确认技术.
- 记者蛋白质测定使用读盘器.
主要成果:
- 在L. reuteri的等离子体转化中取得了成功的证明 DSM20016.
- 确认成功转换的既定方法.
- 通过记者蛋白实现了系统反的测量.
结论:
- 标准化协议有助于对L. reuteri进行基因操纵 DSM20016.
- 集中信息减少了临时方法,并简化了研究入口.
- 这些协议使研究人员能够利用L. reuteri作为合成生物学的底盘.
