准备平面细胞用于高含量光显微镜,使用RNA in situ杂交和免疫细胞化学
Markus A Grohme1, Olga Frank1, Jochen C Rink2
1Max Planck Institute for Molecular Cell Biology and Genetics, Dresden, Germany.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|July 10, 2023
概括
这项研究为平面细胞提供了新的高含量光显微镜测试. 这些多重分析测量生物标志物,如使用RNA FISH和免疫细胞化学的增殖细胞,使得详细的生物学见解.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
- 再生生物学 再生生物学
背景情况:
- 高含量光显微镜提供了对生物系统的定量见解.
- 平面研究需要有效的方法来分析细胞生物标志物.
- 现有的整体染协议为新测试开发提供了基础.
研究的目的:
- 开发和验证固定平面细胞的模块化试验集.
- 为了使多个生物标志物的多重测量使用高含量显微镜.
- 为RNA光 in situ杂交 (RNA FISH) 和免疫细胞化学提供协议.
主要方法:
- 适应微波板中固定平面细胞的测定方法.
- 平面组织分解成单细胞悬浮体.
- 实施RNA FISH和免疫细胞化学对酸化组合素H3和5--2'-脱氧氨 (BrdU) 的应用.
主要成果:
- 成功开发了对平面细胞的多重生物标志物量化试验.
- 测试与各种尺寸的平面相容.
- 已建立的协议需要通过利用现有试剂进行最小的额外投资.
结论:
- 开发的测试为平面细胞的高含量分析提供了强大的工具.
- 这种方法有助于对增殖和基因表达进行定量测量.
- 这些方法对于各种平面研究应用来说是可访问和可扩展的.


