使用吸收光谱光度计,在固定甲素的人类大脑中绝对量化神经黑色素

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 生物化学 生物化学
• 病理学 病理学 病理学

背景情况:

• 帕金森病 (PD) 的特点是黑体质中染色神经元的退化,与神经黑色素 (NM) 的减少有关.
• 量化NM是具有挑战性的,因为其不可溶性,阻碍研究其在PD病因学中的作用和prodromal生物标志物的发展.
• 现有的量化方法已经过时,仅限于新鲜冷的组织,无法准确测量固定样本中的NM度.

研究的目的:

• 开发和验证一种新型,强大的协议,用于在甲胺固定黑色物质组织中绝对量化神经黑色素.
• 克服现有方法的局限性,使得大量样本能够同时分析,使用最小的组织.
• 建立一个调查影响NM水平的因素和推动帕金森病生物标志物开发的基础.

主要方法:

• 开发了一种新的协议,涉及组织分解,在氧化物中溶解神经黑色素,并测量350nm的吸收度.
• 合成的神经黑色素,通过从多巴胺和L-氨酸的酶合成产生的,随后是高温老化,被用于校准.
• 该协议使用来自三个大脑的固定黑色物质组织进行了验证,评估了可重复性,并将光谱和元素特性与本地NM进行了比较.

主要成果:

• 该协议成功地溶解了固定的黑色物质组织,并量化了从0.23-0.55μg/mg组织的神经黑色素度.
• 量化证明了高可重现性,试验间变化系数为6.75% (n=5).
• 合成的神经黑色素在吸收光谱和元素组成上与 substantia nigra 神经黑色素有很好的重叠,证实了它的使用.

结论:

• 开发的协议可靠地测量了固定在甲胺的黑色物质组织中的绝对神经黑色素度.
• 这种方法克服了以前的局限性,使大规模样本分析成为可能,并促进了对神经黑色素在帕金森病中的作用的研究.
• 该协议为开发前期帕金森病的新生物标志物提供了基础,并促进了我们对这种疾病的理解.