商用分化介质对条件重编程的人类支气管上皮细胞细胞的细胞形态,功能和抗病毒反应进行比较

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 呼吸系统医学 呼吸系统医学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 初级支气管上皮细胞 (pBECs) 对于模拟呼吸道反应至关重要.
• 条件重编程 (CR) 增强了pBEC的扩散.
• 培养介质的变化可以影响细胞行为和实验结果.

研究的目的:

• 为了比较条件重编程的pBECs (CRpBECs) 的形态和功能差异,使用两个常见的空气-液体接口 (ALI) 介质进行差异化.
• 评估这些媒介对先天免疫反应对鼻病毒感染的影响.

主要方法:

• 从健康捐赠者获得的CRpBEC在ALI中使用PneumaCult (PN-ALI) 或基于BEGM的媒体 (AB-ALI) 在28天内进行了差异化.
• 评估过体电阻 (TEER),免疫光,组织学,毛活动,离子通道功能和细胞标志物表达.
• 在Rhinovirus-A1b感染后评估病毒RNA和抗病毒蛋白质表达.

主要成果:

• 与BEGM介质相比,PneumaCult中的CRpBEC显示了较小的细胞大小,较低的TEER和减少的乳毛跳动频率.
• PneumaCult培养物增加了FOXJ1表达,更多的纤毛细胞,更大的纤毛区域,更高的细胞内粘膜,以及增强的化物通道电流.
• 两种媒介组之间的病毒RNA水平或宿主抗病毒反应没有显著差异.

结论:

• 在PneumaCult和基于BEGM的介质中区分的CRpBEC之间存在明显的结构和功能差异.
• 这些媒体依赖的变异影响细胞形态,纤维化,粘素含量和离子通道活性.
• 研究人员在为特定的气道研究问题设计CRpBEC ALI实验时必须考虑这些差异.