主要小鼠不变天然杀手T (iNKT) 细胞净化和转导
Gloria Delfanti1, Paolo Dellabona1, Giulia Casorati1
1Experimental Immunology Unit, Division of Immunology, Transplantation and Infectious Diseases, San Raffaele Scientific Institute, Milan 20132, Italy.
Bio-protocol
|July 14, 2023
概括
这项研究提出了一种有效的方法来扩大和设计小鼠不变天然杀手T (iNKT) 细胞用于癌症免疫疗法. 该协议产生了大量纯粹的,转基因iNKT细胞用于临床前采用细胞疗法研究.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞疗法细胞疗法
- 癌症研究 癌症研究
背景情况:
- 不变的自然杀手T (iNKT) 细胞对于瘤免疫监测至关重要.
- 工程iNKT细胞与仿真抗原受体 (CARs) 或T细胞受体 (TCRs) 提供强大的抗癌治疗潜力.
- 目前的局限性包括iNKT细胞的稀有性和在采用细胞疗法 (ACT) 进行ex vivo扩张方面的挑战.
研究的目的:
- 描述一种强大且可扩展的协议,用于获得适合基因工程的大量小鼠iNKT细胞.
- 促进iNKT细胞在癌症免疫治疗和体外试验的临床前研究中的使用.
主要方法:
- 从转基因小鼠IVα14-Jα18的脏中丰富iNKT细胞.
- 使用抗CD3/CD28珠子激活iNKT细胞,以提高可复制性和效率.
- 通过旋转注射激活的iNKT细胞的逆转录病毒 (RV) 转导.
主要成果:
- 在15天内产生数百万个高度纯净,稳定转化的iNKT细胞的协议.
- 该方法避免了专门的仪器仪表,并将所需的小鼠数量最小化.
- 通过抗CD3/CD28颗粒激活被证明比抗原载荷的树突细胞更有效,耗时更少.
结论:
- 该协议提供了一种实用且有效的手段,可以为临床前癌症研究产生大量工程iNKT细胞.
- 该方法支持iNKT基于细胞的采用细胞疗法 (ACT) 策略的发展.
- 生成的iNKT细胞已经准备好用于体外试验和体内临床前研究.
