酶性消化对单细胞悬浮产生的影响来自外围人类肺组织

科学领域:

• 肺部医学 肺部医学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 翻译性肺生物学研究越来越多地使用单细胞分析.
• 从人类肺部获得单细胞悬浮剂需要机械和酶性消化.
• 现有的酶性消化协议存在潜在的限制,影响细胞产量和表型.

研究的目的:

• 为了比较人类肺组织的五种常见的酶性消化协议.
• 建立一个框架来评估和比较使用不同消化协议的研究.
• 了解特定酶对肺部研究相关的细胞群的影响.

主要方法:

• 在人类肺部样本上并行执行了五种常见的酶性消化方案.
• 机械消化 (gentleMACSTM) 与酶治疗一起使用.
• 细胞数量,活力 (Nexcelom细胞计) 和细胞表型 (光谱流细胞计) 被量化.

主要成果:

• 与单独的机械消化相比,所有测试的酶性协议都改善了细胞产量和活力.
• 含有dispase的协议改变了免疫标记物的表达,增加了单细胞/巨细胞的产量,同时影响了上皮细胞群.
• 与原酶D相比,原酶P产生了更多的膜上皮细胞 (AT1,AT2) 和更少的内皮细胞.

结论:

• 酶性消化协议在人类肺部单细胞制剂中显著影响细胞产量和表型.
• 协议选择应以具体的研究问题为指导,考虑对免疫,上皮和内皮细胞的影响.
• 这些发现为标准化和比较不同方案的肺单细胞研究提供了基础.