在多囊卵巢综合征诱导的老鼠中,基于LC-MS/MS对类固醇生物标志物的量化
Sristi Agrawal1, Amol Chhatrapati Bisen1, Sachin Nashik Sanap1
1Pharmaceutics and Pharmacokinetics Division, CSIR-Central Drug Research Institute, Lucknow 226031, India; Academy of Scientific and Innovative Research (AcSIR), Ghaziabad 201002, India.
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
|July 15, 2023
概括
这项研究开发了一种新的LC-MS/MS方法,以准确测量PCOS类固醇生物标志物. 与对照组相比,PCOS老鼠的孕激素,17-α基孕激素和的水平发生了变化.
科学领域:
- 内分泌学 在内分泌学.
- 生物标志物发现发现
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 多囊卵巢综合征 (PCOS) 是一种内分泌疾病,其特点是荷尔蒙失衡,影响生殖和类固醇生成.
- 关键的类固醇生物标志物,包括孕激素 (P4),17-α氧孕激素 (17OHP4) 和 (T4),在PCOS中显著改变.
- 目前用于类固醇生物标志物分析的方法缺乏可追溯性,需要大样本大小,阻碍了可靠的PCOS诊断和研究.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法,用于准确量化PCOS相关的类固醇生物标志物.
- 为了解决与现有分析技术相关的可追溯性和样本大小的局限性,用于类固醇代谢组分析.
- 将PCOS诱导的老鼠中的类固醇生物标记水平与正常对照进行比较,提供对类固醇生成途径的见解.
主要方法:
- 使用验证的LC-MS/MS方法,在C18柱上采用同位素分离,其中具有氨和水性酸的移动相.
- 血样本经过蛋白质沉 (PPT),然后进行液体-液体提取 (LLE) 进行样本制备.
- 方法验证包括线性 (r2 > 0.99),准确性,精度,稳定性,恢复 (60-85%) 和矩阵效应 (<±15%) 根据USFDA标准.
主要成果:
- 开发的LC-MS/MS方法表现出卓越的性能,符合USFDA对线性,准确性,精度,稳定性,恢复性和矩阵效应的验证标准.
- 药物动力学分析显示,与正常对照组相比,PCOS诱导的老鼠中17OHP4和T4的Cmax值显著更高 (约2倍).
- 相反,PCOS诱导的老鼠对P4的Cmax值明显较低 (约2倍),与正常对照相比.
结论:
- 新的LC-MS/MS方法为PCOS研究中的关键类固醇生物标志物的量化提供了可靠和敏感的工具.
- 这些发现突显了PCOS中类固醇生成途径的显著变化,由P4,17OHP4和T4的差异Cmax值证明.
- 这项研究提供了有价值的科学数据,以促进PCOS病理生理学的理解,并提高PCOS治疗类固醇生物标志物分析的临床适用性.
