在LTQ-Orbitrap® Velos Pro上使用逆相液态染色学和数据依赖采集工作流程对氧利平的全面分析
Kodjo Nouwade1, Sana Tfaili1, Bastien Prost2
1Lip(Sys)(2) - Chimie Analytique Pharmaceutique, UFR Pharmacie, Université Paris-Saclay, Orsay, France.
Talanta
|July 16, 2023
概括
这项研究引入了一种新的质谱法,用于分析氧利平,提高复杂生物样本的精度和灵敏度. 这种新的方法为量化这些重要的炎症媒介提供了一个可靠的替代方案.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 氧利平在炎症过程和各种疾病中至关重要.
- 分析氧利平因结构复杂性和需要区分异构体/异构体而具有挑战性.
- 现有的方法,如选择性/多重反应监测 (SRM/MRM),可以在复杂矩阵中产生假阳性.
研究的目的:
- 在LTQ-Orbitrap® Velos Pro质谱仪上使用数据依赖采集 (DDA) 开发一种新,高度敏感和特定的氧利平量化方法.
- 通过获得完整的MS/MS光谱来克服SRM/MRM的局限性,以改善分子确认.
- 在复杂的生物样本中验证新的DDA方法的准确性,精度,灵敏度和特异性.
主要方法:
- 在LTQ-Orbitrap® Velos Pro质谱仪上开发DDA工作流程,用于氧利平分析.
- 优化线性陷和轨道陷分析器的采集频率,以提高每个峰值的灵敏度和数据点.
- 染色图形的细分和高能碰撞解离 (HCD) 能量的优化,以提高检测值.
主要成果:
- 实现了低检测值:前列腺类的~2 pg和白血类/氧化物种的0.02-2 pg.
- 经过验证的方法具有特异性 (RSD <10%),准确性 (86.56%-114.93%),精度 (<15%的日内/日间RSD).
- 建立了从2.5到12,500 pg的线性范围,证明了定量能力.
- 成功地比较了由J774和THP-1巨细胞释放的前列腺素,这些巨细胞被激发了脂多糖 (LPS).
结论:
- 对LTQ-Orbitrap®的DDA方法为复杂矩阵中的eicosanoid量化提供了一个强大的MRM替代方案.
- 这种新的方法通过提高特异性和减少假阳性来增强氧利平分析.
- 这项研究成功地描述了不同类型的巨细胞释放的氧利平,为炎症反应提供了新的见解.
