开发一种快速而精确的BCG疫苗活力测试,使用流细胞计与MTT和殖民地形成单元测试相比,使用流细胞计

科学领域:

• 疫苗学 疫苗学 疫苗学
• 微生物学 微生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 卡尔梅特-盖林杆菌 (BCG) 是一个重要的活衰减疫苗,在157个国家使用.
• 目前的质量控制依赖于殖民地形成单位 (CFU) 试验,这耗时且容易变化.
• 现有的流细胞计量方法需要额外的设备,如Coulter计数器,限制其实用性.

研究的目的:

• 开发和验证快速的,自动化的方法,用于BCG活性的细胞计数.
• 为了比较流量细胞计和色度测试的准确性和效率与传统的CFU方法.
• 消除对专用设备的需求,减少BCG质量控制中的分析时间.

主要方法:

• 使用的醇色/酸染料,含有原基参考珠,用于基于流细胞计的可行计数.
• 采用了色度测量技术,使用四盐进行可活细胞计数.
• 与标准CFU试验对比,验证了流细胞计和色度测量方法.

主要成果:

• 颜值测定显示了高精度,准确性,以及与CFU测定有很强的正相关性.
• 流细胞计显示了高精度,准确区分活细胞,受伤细胞和死亡BCG细胞,并显示了与CFU试验的完美正相关性.
• 这两种新方法显著减少了26天以上的分析时间,并通过自动化消除了人工干预的需要.

结论:

• 流细胞计和色度测试为传统的BCG CFU测试提供了可靠和高效的替代方案.
• 这些自动化方法通过提供更快,更一致的结果来加强疫苗质量控制.
• 采用这些技术可以提高全球BCG疫苗接种计划的可访问性和可靠性.