通过使用流细胞计来确定最佳的适应器与珠子比率的方法.
Sun Young Lee1,2, Eun-Ok Kim3, Daehyuk Jang1,2
1Lab of Functional Aptamer, Department of Bioindustry and Bioresource Engineering, College of Life Sciences, Sejong University, Seoul, Republic of Korea.
Scientifica
|July 20, 2023
概括
这项研究引入了一种流细胞计法,以找到最佳的aptamer-to-bead比率用于固定. 每个珠子1.28 × 10^5的最佳比率最大限度地提高了目标结合效率.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物结合化学 生物结合化学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 对于各种应用来说,有效地在珠子上固定阿普坦是至关重要的,但仍然具有挑战性.
- 目前优化阿普坦与珠子比率的方法是有限的.
研究的目的:
- 开发和验证一种基于流细胞计的新方法,用于确定最佳的阿巴和珠子比率.
- 为了确定最大限度地提高对目标的aptamer结合效率的理想比例.
主要方法:
- 利用流式细胞计量分析光强度与体静止相关.
- 采用光显微镜进行补充可视化.
- 在结合后量化自由胺度.
- 评估了在不同的aptamer-to-bead比率下目标结合效率.
主要成果:
- 光强度在2.56 × 10^5.5的aptamer-to-bead比率上达到峰值.
- 最佳的目标结合效率是在每颗珠子1.28 × 10^5的aptamers的比率下实现的.
- 与最佳结合比率相比,在较高的比率下观察到显著的阿胺损失.
结论:
- 拟议的流式细胞计量方法提供了一种简单而有效的方法,用于优化阿普坦体固定.
- 1.28 × 10 ^ 5的最佳阿帕特马与珠子的比率对于最大限度地提高阿帕特马功能化珠子的结合性能至关重要.
