快速构建大肠杆菌 (Escherichia coli) 底盘,并将异二醇利用途径的基因组多位置集成,以实现高效和稳定的 terpenoid 积累
Yu-Zhou Wang1, Hong-Yan Jing1, Xin Li1
1School of Food Science and Pharmaceutical Engineering, Nanjing Normal University, Nanjing, Jiangsu Province, China.
Biotechnology journal
|July 21, 2023
概括
工程Escherichia coli有效地使用异二醇利用途径 (IUP) 生产特类. 与基于等离子体的系统相比,IUP的基因组集成提高了生产稳定性和标位.
科学领域:
- 代谢工程是代谢工程.
- 合成生物学 合成生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 类是有价值的化合物,具有多样化的应用.
- 异二醇利用途径 (IUP) 提供了微生物类合成的潜力.
- 开发强大的微生物底盘,以实现高效和稳定的化物生产仍然是一个挑战.
研究的目的:
- 使用异二醇利用途径 (IUP) 构建一个工程化大肠杆菌底盘,用于稳定和高效的类化合物合成.
- 为了提高工程微生物宿主中类生产的有效性和稳定性.
主要方法:
- 促进器工程和核糖体结合站点 (RBS) 库的建设被用来优化IUP表达.
- 与CRISPR相关的转体酶被用于IUP表达盒的基因组集成.
- 对诱导剂和基质度进行了优化,以最大限度地提高利科的产量.
主要成果:
- 百合素标位从0.087增加到8.67毫克OD600^-1.
- 与基于等离子体的菌株相比,基因组集成的菌株显示出1.78倍高的柳科标位.
- 稳定的IUP表达维持了10代,与基于等离子体的系统不同,该系统在第三代时显示损失.
结论:
- IUP表达盒的基因组集成提供了一个高效和稳定的策略,用于E. coli中的类生产.
- 这种方法为构建强大的微生物底盘,用于工业类合成提供了有价值的见解.
- 开发的菌株在生产效率和遗传稳定性方面都取得了显著的改进.
