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Updated: Jul 22, 2025

10:00
RiboTag Immunoprecipitation in the Germ Cells of the Male Mouse
Published on: March 4, 2020
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FISH-Flow用于量化小鼠和人类细胞中新生和成熟的核糖体RNA
Charles Antony1, Patrick Somers1, Erin M Gray1
1Division of Hematology and Oncology, Department of Medicine, University of Pennsylvania Perelman School of Medicine, Philadelphia, PA 19104, USA.
STAR protocols
|July 23, 2023
概括
本研究提出了一种FISH-Flow协议,用于量化小鼠和人类细胞中新生和成熟的核糖体RNA (rRNA). 该方法允许在细胞周期各个阶段进行单细胞rRNA测量.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 核糖体RNAs (rRNAs) 对蛋白质合成至关重要.
- 在单细胞分辨率下量化rRNA水平对于理解细胞过程至关重要.
- 现有的方法可能缺乏详细的rRNA分析的精度或吞吐量.
研究的目的:
- 建立和验证FISH-Flow协议,用于量化新生和成熟的rRNAs.
- 为了使单细胞rRNA测量在老鼠和人类细胞系.
- 评估不同细胞周期阶段的rRNA水平.
主要方法:
- 开发一个光在现场杂交-流动细胞计 (FISH-Flow) 协议.
- 使用光标记的寡核酸探针,针对特定的rRNA分子.
- 纳入DNA染色用于细胞循环分析和流细胞计量量化.
主要成果:
- 使用FISH-Flow成功量化新生的47SrRNA和成熟的18S和28SrRNA.
- 在小鼠和人类细胞中证明该协议的适用性.
- rRNA水平与细胞周期进展的相关性.
结论:
- 提出的FISH-Flow协议为单细胞rRNA量化提供了一个强大的方法.
- 这种技术有助于研究与细胞状态有关的rRNA动态,包括细胞周期.
- 该协议为分子和细胞生物学研究提供了宝贵的工具.

